Par le Dr Piriya Yoganathan et le Dr Eric Yung
Des taux de réponse élevés dans les leucémies et lymphomes à cellules B réfractaires ont récemment été obtenus grâce à la thérapie cellulaire CAR-T ciblant l'antigène CD19 des lymphocytes B. La thérapie cellulaire CAR-T est un traitement hautement personnalisé qui nécessite l'incorporation d'un gène CAR synthétique aux lymphocytes T du patient. Ce processus est réalisé par un système lentiviral. La production du lentivirus nécessite plusieurs étapes essentielles, notamment : i) la fabrication de l'ADN plasmidique codant pour le gène CAR synthétique et les plasmides auxiliaires ; ii) l'introduction de ces plasmides dans les cellules productrices pour générer le virus ; et iii) la récolte et la purification du virus généré.
Un programme BioCanRx hautement collaboratif, multidisciplinaire et multirégional, auquel participent l'Institut de recherche de l'Hôpital d'Ottawa (IRHO) et la BC Cancer Agency (BCCA), a été mis sur pied afin de développer un portefeuille de thérapies cellulaires CAR-T CD19 au Canada. Dans le cadre de ce programme plus vaste, le groupe du Dr Rob Holt (BCCA-Vancouver) est responsable de deux aspects principaux : i) la conception et la validation préclinique du système d'administration lentivirale ; et ii) la conception et la validation de la construction CAR-T, y compris la génération de l'ADN destiné à la production lentivirale par le Centre de fabrication de produits biothérapeutiques (CFB) de l'IRHO.
Les deux groupes ont été confrontés à un défi similaire : produire de grandes quantités de lentivirus. BCCA a effectué des travaux supplémentaires de validation et d'optimisation de la conception, et BMC a généré les quantités nécessaires à l'utilisation clinique. Grâce au programme d'échange de laboratoires BioCanRx, le Dr Eric Yung, du groupe du Dr Holt, a visité BMC à Ottawa en novembre 2017. Cette visite a donné lieu à des résultats mutuellement bénéfiques, permettant aux deux parties de progresser considérablement pour surmonter leurs difficultés. BMC possède une vaste expertise en matière de production virale à grande échelle selon les BPF, et la visite d'Eric a permis de mieux comprendre comment les procédés individuels à petite échelle peuvent être mis à l'échelle, ou quelles alternatives existent. Eric a pu avoir des discussions approfondies avec l'équipe des BPF concernant les limites liées aux grands volumes de surnageant viral. Le passage d'une production à l'échelle du millilitre à une production à l'échelle du litre pose des défis importants. Ces défis incluent la détermination des types de récipients pour la culture cellulaire, la quasi-totalité des étapes de manipulation des fluides et la purification en aval du surnageant viral. Eric a pu visiter les installations de BMC et interagir avec son équipe afin de mieux comprendre ces étapes. Il a pu explorer les protocoles développés par BMC avec le personnel afin de mieux comprendre comment les adapter aux installations de BCCA. Le personnel de BMC a pu échanger avec Eric sur la biologie lentivirale et le titrage, ainsi que sur la facilitation du partage des données et des discussions en temps réel sur les résultats de diverses études.
L’interaction et la communication en personne entre Eric (BCCA-Vancouver) et le personnel du BMC, rendues possibles par l’échange de laboratoire BioCanRx, ont été très bénéfiques pour faire avancer les efforts de développement de processus de ce programme.
Dr Piriya Yoganathan est chercheuse postdoctorale au Centre de fabrication de produits biothérapeutiques de l'Institut de recherche de l'Hôpital d'Ottawa et participe au développement de procédés de fabrication de lentivirus pour la thérapie cellulaire CAR-T. Elle a obtenu son doctorat à l'Université Queen's, au Département de pathologie et de médecine moléculaire, avec une spécialisation en recherche sur le cancer.
Dr Eric Yung Le Dr Yung est chercheur à l'Agence du cancer de la Colombie-Britannique, au sein du laboratoire du Centre des sciences du génome du Dr Rob Holt. Le Dr Yung a obtenu son doctorat à la Faculté de médecine Albert Einstein, où il a travaillé sur la compréhension du cycle de vie du VIH-1. Il a également mené des recherches postdoctorales sur la thérapie génique ainsi que sur le développement et l'utilisation de vecteurs viraux. Il supervise actuellement la conception, la construction et les essais précliniques de vecteurs lentiviraux pour le pipeline multi-sites de développement de cellules CAR-T.